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生物納米壓痕儀測試細胞力學(xué)特性作為新的腫瘤標(biāo)志物

更新時間:2023-06-28      點擊次數(shù):538

癌癥是全球主要死亡原因之一,其是由正常細胞轉(zhuǎn)變?yōu)閻盒约毎a(chǎn)生的。這些變化是遺傳傾向和環(huán)境因素(致癌物)之間相互作用的結(jié)果。最常見的癌癥治療方法是單獨或聯(lián)合手術(shù)、放療和化療。具體的治療方法取決于癌癥的類型、疾病的嚴(yán)重程度、進展速度、患者的健康狀況以及對治療的反應(yīng)。

先進的機械表征工具可以加深對癌細胞形態(tài)和力學(xué)及其在發(fā)育、生理學(xué)和疾病中的作用的理解。

細胞硬度、細胞外基質(zhì)(EMC)和微環(huán)境機械特性的變化會影響癌癥的進展。雖然癌細胞通常比健康細胞軟,但由于與纖維化相關(guān)的基質(zhì)硬化,腫瘤往往比周圍組織更硬。此外,ECM重塑導(dǎo)致腫瘤微環(huán)境發(fā)生變化,導(dǎo)致轉(zhuǎn)移性播散。ECM重塑可能會改變細胞行為,例如基質(zhì)幾何形狀和剛性的識別、細胞骨架重組、細胞極化、運動和增殖。從這個意義上說,Optics11 Life生物納米壓痕儀成為癌癥新治療方法的強大方法。該設(shè)備可以識別正常細胞和惡性細胞之間的機械差異并預(yù)測癌癥進展,將這些方法轉(zhuǎn)化為臨床和治療干預(yù)措施可以實現(xiàn)新的癌癥治療。

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來自利愛爾蘭利莫瑞克大學(xué)(University of Limerick)的Kieran McGourty和David Newport團隊,研究了細胞骨架損傷對細胞慣性位置的影響。使用細胞松弛素處理兩種代表性癌細胞系,使用粒子條紋成像研究它們的慣性位置,并在良性和轉(zhuǎn)移性細胞系之間進行比較。為了確定和量化細胞中這種遷移的物理變化,使用染色和納米壓痕技術(shù)來確定細胞的大小、圓形度和彈性模量。結(jié)果發(fā)現(xiàn),暴露于松弛素會導(dǎo)致細胞彈性模量下降,但大小或形狀沒有變化。這導(dǎo)致良性、較硬的癌細胞比轉(zhuǎn)移性、可變形的癌細胞更均勻地分布在通道寬度上。此外,兩種細胞系彈性模量的降低導(dǎo)致向通道中心的遷移增加。這些結(jié)果表明,彈性模量在此類細胞的慣性遷移中所起的作用可能比以前認(rèn)為的更大。

使用Chiaro納米壓痕儀測量細胞彈性模量,半徑為8.0 μm的球形探針,懸臂彈簧常數(shù)為0.031 N/m。將樣品載玻片安裝在倒置顯微鏡上,以便將探針聚焦在細胞中心。每種實驗條件使用三個不同傳代數(shù)的培養(yǎng)皿,隨機選擇30-40個細胞,室溫下在每個培養(yǎng)皿中測試。將探針放置在每個細胞的中心上,以確保最大的接觸表面。

先前已經(jīng)表明,在癌細胞和非癌細胞中,中心和外周納米壓痕位置之間沒有統(tǒng)計學(xué)差異。細胞以1 μm/s的加載速度下壓6 μm,持續(xù)時間為1 s。未能滿足0.008 μN最小載荷的壓痕被排除在外,因為這些細胞有可能無法正確固定到皿的底部。



從最大載荷的初始22%開始分析力-壓痕曲線。數(shù)據(jù)采集后,使用D'Agostino-Pearson正態(tài)性檢驗來檢查,并使用ROUT方法識別異常值,并將其從最終數(shù)據(jù)集中排除。數(shù)據(jù)以“平均值±標(biāo)準(zhǔn)差"表示。使用方差分析進行統(tǒng)計分析,并使用兩個樣本的不相等方差來計算組之間的P值。

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相關(guān)研究結(jié)果在《Biophysical Journal》雜志上以題目"The influence of cell elastic modulus on inertial positions in Poiseuille microflows"的文章發(fā)表。

doi: 10.1016/j.bpj.2021.01.026